1. 细胞类样本

• 1.1 贴壁细胞

  样本类型	送样量	样本保存和运输	注意事项
  冻存贴壁细胞	常量ATAC：>50万/份 微量ATAC：>1万/份 细胞复苏后活性大于80%，建议送2份，一份备份	冻存液冻存后将冻存管置于密封袋中，液氮保存，干冰运输。	送样前需消化成单细胞悬液，尽量去除细胞团/碎片/杂质等。
  新鲜贴壁细胞	常量ATAC：>10万/份 微量ATAC：>5千/份 活性大于80%，建议送2份，一份备份	至少提前2天预约实验； 推出短途、中途、长途不同运输方案，具体送样方案联系诺禾。
  冻存贴壁细胞处理方法： （1）取出贴壁细胞，显微镜下观察，确定生长状态是否良好，是否有细菌污染。 （2）吸掉培养基，向细胞培养瓶/皿中加入1×PBS（根据培养器皿调整PBS用量），洗2次。 （3）弃尽PBS，加入适量胰酶放回37℃培养箱中消化，利用完全培养基终止反应。 （4）加入500μl 1×PBS洗涤，4°C，500g离心5min，小心吸掉全部上清。 （5）用冻存液（60%完全培养基+30%FBS+10%DMSO）（百分比指体积比）重悬细胞沉淀，按照建议送样量分装，移至冻存管（请提前配置细胞冻存液且置于冰上预冷，防止新配置的冻存液过热损伤细胞，待冻存液恢复室温后使用）。 （6）将冻存管置于程序降温冻存盒，于-80℃冰箱梯度降温并暂时保存（请严格按照程序降温来操作，对细胞造成的损伤最小）。24h后，请将程序降温盒中的细胞样本转移至液氮中保存。若没有程序降温冻存盒，建议使用人工传统降温方法：冻存管置于4℃ 10min→-20℃ 30min→-80℃ 16-18h（或过夜，最长放置不超过一个月）→转移至液氮长期储存。 注意：由于细胞复苏后需活细胞数大于5万，因此冻存细胞量至少超出10倍（50W左右，若针对特殊细胞则应加大细胞量）。
  新鲜贴壁细胞处理方法： （1）确定生长状态良好且无污染； （2）吸掉培养基，加入适量 1×PBS（体系中不可含 Mg2+和 Ca2+）洗 2 次，吸尽培养基； （3）小心吸除 PBS，加入适量胰酶，37℃培养箱中消化，消化时间和方式请根据细胞类型进行调整，以显微镜下观察细胞是否分散作为调整标准； （4）加入 5 mL 含血清的完全培养基终止消化，用吸管轻轻地吹下贴壁细胞，500×g 离心 5 min， 小心去上清； （5）加入 1×PBS 清洗一次，4℃ 500×g 离心 5 min，弃上清； （6）用 1 ml 以上的培养基/血清重悬细胞沉淀，转移至 2 ml 离心管中，用 parafilm 对离心管进行密封。

  
  
  

• 1.2 悬浮细胞

  样本类型	送样量	样本保存和运输
  冻存悬浮细胞	>常量ATAC：>50万/份 微量ATAC：>1万/份 细胞复苏后活性大于80%，建议送2份，一份备份。	冻存液冻存后将冻存管置于密封袋中，液氮保存，干冰运输
  新鲜悬浮细胞	>常量ATAC：>10万/份 微量ATAC：>5千/份 活性大于80%，建议送2份，一份备份	至少提前2天预约实验； 推出短途、中途、长途不同运输方案，具体送样方案联系诺禾。
  冻存悬浮细胞处理方法： （1）取出悬浮细胞于显微镜下观察，确定培养细胞生长状态是否良好，是否有细菌污染。 （2）收集细胞，吸掉全部上清，加入500µl 1×PBS洗涤，4°C 500g离心5min，小心弃上清。 （3）用冻存液（60%完全培养基+30%FBS+10%DMSO）（百分比指体积比）重悬细胞沉淀，分装细胞，移至冻存管（请提前配置细胞冻存液，防止新配置的冻存液过热损伤细胞，待冻存液恢复室温后使用）。 （4）将冻存管置于程序降温冻存盒，于-80℃冰箱梯度降温并暂时保存。24h后，请将程序降温盒中的细胞样本转移至液氮中保存。若没有程序降温冻存盒，建议使用人工传统降温方法：冻存管置于4℃ 10min→-20℃ 30min→-80℃ 16-18h（或过夜，最长放置不超过一个月）→转移至液氮长期储存。 注意：由于细胞复苏后需活细胞数大于5万，因此冻存细胞量至少超出10倍（50W左右，若针对特殊细胞则应加大细胞量）。
  新鲜悬浮细胞处理方法： （1）确定细胞生长状态良好且无污染； （2）进行细胞计数，每样本取10万/5千个细胞以上，细胞悬液 4℃ 500×g 离心 5 min，小心去上清，离心条件可根据细胞类型进行调整； （3）加入 1 mL 1×PBS 重悬细胞沉淀，清洗一次，4℃ 500×g 离心 5 min，小心弃上清； （4）用 1 ml 以上的培养基/血清重悬细胞沉淀，转移至 2 ml 离心管中，用 parafilm 对离心管进行密封。

2. 动物组织

• 样本类型	送样量	样本保存和运输
  动物组织	常规组织：50mg/份，备份1-2份。特殊组织类型需评估。	置于密封袋中，液氮速冻，干冰运输。
  动物组织处理方法： （1）取下新鲜组织，立即剔除结缔组织和脂肪等杂质。 （2）将组织转移至新离心管中，用预冷的PBS溶液漂洗至将组织表面的残留血液冲洗干净。 （3）将冲洗干净的组织样本取出并用无尘纸擦干水分，若组织体积较大，应在冰上将组织切成小块或薄片（每份约50mg），之后置于2ml旋盖冻存管内，准备标记样本名称。 （4）迅速置于液氮中冷冻30min，然后转移至-80℃冰箱中保存。

3. 植物组织

• 样本类型	送样量	样本保存和运输
  植物组织	幼嫩的组织叶片300mg，种子、根等特殊组织部位500～1000mg。备份1-2份。特殊组织类型需评估。	置于密封袋中，液氮速冻，干冰运输。 建议选取幼嫩的叶片，种子、根等。
  植物组织处理方法： （1）从植物体上取下新鲜组织，后用清水将材料表面的灰尘或泥土冲洗干净，吸干。 （2）如果组织体积较大，应在冰上将组织切成小块或薄片，然后放入2ml或更大体积的旋盖冻存管中，每份>300mg，准备标记样本名称。 （3）立即浸入液氮中速冻30min，之后保存于-80℃冰箱。

4. 其他类型样本

• 样本类型	送样量
  全血	需要分离出细胞，按细胞要求送样。
  自建库	体积≥15μl；qPCR浓度大于2nmol/L。

5. 注意事项

6 样本打包及寄送建议

• 6.1 样本的打包

  （1）核酸样品建议使用质量好的1.5ml或2ml 低吸附EP管装载样品，并用封口膜封口。为了防止样品管破裂，或者污染和混乱，请不要使用诸如PCR管、0.5ml EP管、八联管、96孔板、深孔板等非标准管送样。非标准管不利于样品保存以及后续实验的进行。如有样品使用非标准管制备，还请在送样前自行转管处理。
  （2）组织样本建议根据送样量使用合适规格带螺纹帽的EP管、冻存管或者离心管装载组织样品，并用封口膜封口。
  （3）为防止样品管在运输过程中受到干冰挤压破裂，最好将样品管放到50ml离心管或其他支撑物中，并在支撑物里添加棉花或卫生纸缓冲。大量样品建议将EP管放置在冻存盒中，并在冻存盒外面包裹气泡垫。如使用锡箔纸、自封袋装载的样品，为防止运输中受挤压破损，建议将锡箔纸折叠整齐装在自封袋中，在样品包装外再用气泡垫包好并固定。
  （4）对于血液样品，建议采用5-10ml 塑料抗凝采血管装载，为了防止运输过程中采血管因挤压而损坏，需要将每支采血管管身均用气泡垫包好，然后放置到塑料或纸质包装盒中。
  （5）用乙醇沉淀的样品由于运输中会有少量乙醇挥发出，建议将样品管盖用封口膜缠绕4-5圈。
  （6）为便于处理和保存，组织样品送样量请不要超过建议送样量的5倍（特殊的得率较低的样品除外）。

• 6.2 样本的名称标识

  （1）所有的样品必须具有清晰的标记，并且简洁明了。
  （2）使用锡箔纸包装的组织样品建议在锡箔纸内外均标记样品名称，并将锡箔纸放在自封袋中，自封袋外面再标记上样品名称，防止锡箔纸上样品名称模糊引起样品混乱。
  （3）使用乙醇沉淀的核酸样品，由于挥发出的乙醇会使记号笔的标记模糊，建议用油性记号笔将样品名称写在标签纸上，然后用透明胶带将标签纸粘贴在样品管壁上，并缠绕2-3圈。
  （4）样品名称建议使用“字母+数字”命名方式标注在管盖。其他信息如日期、浓度、物种等可标注在管壁。所有标注内容需与《样品信息单》保持一致。